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        公司名稱:赫澎(上海)生物科技有限公司

        聯系人:張碩

        電話:18616545970

        手機:13122891558

        傳真:

        郵件:hepeng20160718@foxmail.com

        地址:上海金山區漕涇鎮亭衛公路3688號

         
        新聞中心

        人胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒赫澎生物新品發布,一步酶免法

        發布時間:2017-07-26瀏覽次數:992返回列表

        赫澎(上海)生物有限公司
        He Peng (Shanghai)Biotechnology Co.,Ltd.
        銷售部:
        張碩:
        QQ:1438227360
        王霞:
        QQ:3418426269
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        傳真 :
        郵箱 :hepeng20160718@foxmail.com
        網址 :www.hepengbio.com
        使用說明書
        檢測原理:
        試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被鈣調素(CAM)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的鈣調素(CAM)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
        樣品收集、處理及保存方法
        1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
        3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
        5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
        自備物品:
        酶標儀(450nm)
        加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
        37℃恒溫箱
        操作注意事項:
        試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶完溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,終結果乘以5才是樣本實際濃度。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。液體組分使用前充分搖勻。
        試劑盒組成:

        注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、3、6、12、24、48μg/mL
        試劑的準備:
        20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
        洗板方法:
        手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
        自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
        操作步驟:
        從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔和樣本孔,標準品孔加不同濃度的標準品50μL;樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;孔不加。 除孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。每孔加入底物A、B50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定孔的OD值。
        結果判斷:
        繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算樣本濃度值。
        試劑盒性能:
        性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
        靈敏度:檢測濃度小于1.0μg/mL。
        特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
        重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
        貯藏:2-8℃,避光潮保存。
        有效期:6個月
        免責聲明:
        試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
        嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。

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